Comment calculer la quantité de bactéries présentes

Dilutions en série

1. Étiqueter les six tubes à essai (contenant chacun 9 ml de milieu de croissance) que de 1 à 6. Étiquette les six plaques d'agar que 1 à 6. Utiliser un pipette et 1 millilitre (ml) de pointes de pipette stériles pour transférer 1 ml de culture bactérienne dans le tube 1.

2. Mélangez bien et le transfert de 1 ml du tube 1 dans le tube 2 en utilisant une pipette et embouts stériles de 1 mL.

3. 
   
   
   
   

   Répétez l'étape 2 pour les tubes restants, chaque fois que le transfert de 1 ml du tube le plus récemment utilisé pour le tube suivant.

4. Utilisez une pipette et embouts stériles 0,1 ml de transférer 0,1 ml du tube 1 à une plaque de gélose. Flamber une tige de verre en forme de L et l'utiliser pour étaler la goutte uniformément autour de la plaque. Incuber la plaque pendant 48 heures à une température appropriée pour que les bactéries utilisées. Différents types de bactéries ont différentes températures de croissance optimales. Si vous ne trouvez pas la température optimale de croissance en utilisant du matériel de référence, essayez incubation des plaques à 25 et 37 degrés.

5. Répétez l'étape 4, à chaque fois que le transfert du liquide à partir d'un tube à essai différent sur sa plaque correspondante.

Les calculs de population

1. 
   
   

   Respecter les six plaques et choisissez celui avec 30 à 200 colonies isolées.

2. Multiplier le nombre de colonies sur la plaque par 10 pour calculer le nombre de cellules par ml de culture à partir du tube de dilution utilisée.

3. Multiplier le nombre de l'étape 2 de 10 ^ (numéro de plaque) pour calculer le nombre de cellules par ml de la culture d'origine. La valeur de 10 ^ (numéro de plaque) est le facteur de dilution de la culture utilisée pour inoculer cette plaque.