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Comment identifier matériau inconnu en microbiologie

Habituellement, un matériau inconnu est une bactérie d'une certaine sorte. Pour déterminer lequel des bactéries, il est, il ya certaines étapes à suivre: l'isolement de l'aide aux bactéries la coloration de Gram déterminer l'ensemble de tests biochimiques et consommée et les tests biochimiques eux-mêmes, qui fournissent une liste de caractéristiques connues de seulement les bactéries dans question. Une fois que ces essais ont été réalisés à l'identité du matériau inconnu peut être déterminée.

Choses que vous devez

  • Échantillon de bactéries inconnues
  • Boucle inoculant
  • Bec Bunsen ou bactéries Incinérateur
  • Milieux biochimiques fournis par la microbiologie instructeur

Isoler le matériel

  1. Utilisez la méthode steak quadrant pour isoler les bactéries inconnus de sorte qu'il peut être utilisé pour des tests biochimiques.




    Stériliser la boucle inoculation par passage dans une flamme du bec Bunsen ou à l'intérieur d'un incinérateur de bactéries. Une fois stérilisés lieu la boucle dans le tube contenant l'échantillon de bactéries inconnues. Placez la boucle d'inoculation sur une section d'un élément nutritif riche en boîte de Pétri de gélose plaquettes ne se propage pas l'échantillon sur toute la plaque. Restériliser la boucle et au lieu d'obtenir les bactéries de l'échantillon, se propager une partie des bactéries à partir de la région juste plaqué, connu comme une quadrant. Une fois une nouvelle zone de la plaque est striée (ce sera quadrant deux), répéter les étapes pour une troisième et quatrième quadrant. Le quatrième quadrant devrait prendre le plus de place sur une plaque car cela est où les colonies les plus isolées de la bactérie va croître.

  2. Une fois l'échantillon de bactéries semble sec sur la plaque, placer le couvercle sur la boîte de Pétri, l'inverser et de les stocker pour l'incubation. Si on ne sait pas quelle température les bactéries se développent au balayage, deux boîtes de Pétri et placez un dans l'incubateur (37 degrés C) et un sur le plateau de laboratoire (pour la température ambiante).

  3. Après incubation, des colonies isolées de bactéries inconnues doivent être présents dans le quatrième quadrant. Si le matériau connu de bactéries contient plus d'une souche de bactérie, la morphologie des colonies différent peut être considéré comme des colonies rouges ou jaunes. Prenez la boucle d'inoculation stérilisée et le placer sur une colonie isolée. Une fois qu'il adhère à la boucle placer la colonie dans un tube de bouillon riche en éléments nutritifs. Mettez le bouchon de tube sur et incuber dans le même emplacement de la plaque a été incubée. Les bactéries dans le tube de bouillon doit juste être une souche de bactéries depuis seulement ces colonies ont été retirés de la plaque.



  4. Le tube de bouillon de bactéries isolées peut maintenant utilisé pour des tests biochimiques. Cependant, différents tests sont utilisés pour différentes bactéries telles que les bactéries Gram + et Gram -. Utilisez la coloration de Gram selon la procédure de l'instructeur de déterminer ce que les bactéries inconnues est. Bactéries Gram + possèdent une paroi cellulaire et coloration de Gram pourpre épais - avoir une mince paroi cellulaire et la tache rose.

  5. Inoculer différents types de tests biochimiques pour déterminer les caractéristiques de la souche de bactérie. Par exemple, si les bactéries, réparties sur une plaque bleue éosine méthylène et les bactéries est de couleur pourpre cela indique qu'il peut fermenter lactose si elle n'a pas, il apparaîtra rose sur la plaque. L'utilisation de ce et d'autres tests biochimiques peuvent aider à affiner ce que les bactéries sont dans l'échantillon inconnu.

Conseils Avertissements

  • Une des étapes les plus importantes est la série quadrant utilisé pour isoler les bactéries. Si pas fait correctement il pourrait y avoir des problèmes de contamination possibles avec le bouillon cultivé comme une culture pure. Cette contamination peut fausser les résultats des tests biochimiques et conduire à la mauvaise identification des bactéries en question. Pratiquer la série quadrant dans d'autres expériences contribuera à améliorer la technique et de produire des colonies isolées mieux.
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